单细胞测序技术正在革命性地推动我们对生命复杂性的认知，然而其高昂的每样本成本和技术复杂性，限制了其在更多实验室和更广泛物种中的普及。尽管多重样本标记技术能有效“降本增效”，但现有的方法往往受限于免疫抗体鱼类特男人、寡核苷酸修饰语总成本高额或操作的注意事项非常复杂。近日，南方海洋科学与工程广东实验室（广州）的陈凯讲师人员在Journal of Genetics and Genomics上发表了一项创新性方法学研究，提出了一种名为HEATag的新型样本标记策略，为我们提供了一个低制造费、跨种类、全手机平台兼容的全新解决方案。

学术期刊简单

Journal of Genetics and Genomics (JGG)是由国内小学科院校显性基因病与成长菌物学设计分析所和国内显性基因病学到承办的知名学界讨论论文杂志，坚持创新驱动于报到生活小学完美和临床医学显性基因病学方面的中国大创新性设计分析重大成果。JGG 2028年度后果指数公式7.1，Scopus学界讨论论文杂志品价指标英文CiteScore 9.9，排名第JCR 2028年度GENETICS & HEREDITY方面Q1区(Top 10%)，BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY方面Q1区，排名第国内小学科院校论文杂志分离菌物学专业类别1区(Top论文杂志)，显性基因病学和生化学与原子核菌物学小类双1区。

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什么样是HEATag

恰当的“二一体”设汁

HEATag是由凝集素和HUH内切酶组合而成的融和核蛋白

「市场定位器」模块电源 - 凝集素

能够识别细胞膜上广泛存在且高度保守的糖基化绘制（如GlcNAc和Neu5Ac）。

「联接器」摸块 - HUH内切酶

可以序列特异性地与普通的、无需化学修饰的单链DNA（ssDNA）检索条型码做出共价相连。

“1+1>2”的作用：将两者融合，得到的HEATag蛋白既能通过凝集素牢牢锚定在细胞膜上，又能通过HUH蛋白携带特定的DNA条形码进行样本量标示与追根。

Fig1: HEATag众多标示原理图示图图

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实际的验测

HEATag真不知道有多用打？

能够 在有所差异先决条件下，保证哺乳期间两栖动物癌人体细胞系单癌人体细胞混样测序

实验室里的设计再精妙，也要经过真实样本的 “实战考验” 才算数。理论研究销售团队为 HEATag 软件设置了多轮 “经济压力自测”，从肿瘤血细胞系到肿瘤血细胞，从常温下到温度过低，从新鲜范本到放置范本，全定位效验它的动态平衡性和安全性。

一号轮检查重要性哺乳期间动物界細胞膜系：科研员的选择了根据人、鼠、仓鼠6个植外来物种群的四个細胞膜（HEK293T、K562、MEF、CHO），在温度使用 HEATag 符号后分层测序。结果是回收公司的 11447 个細胞膜中，85.66% 都能按照 HEATag 长条状码查询更准确配对到原植外来物种群，样品间对称环境污染极低，UMAP 聚类介绍介绍更为间接材料，HEATag 长条状码查询与植外来物种群活性聊天什么是基因组有特点高速一样的。 没过多久，公测经济前提必备条件进这一步加剧：的研究各种相关人员试穿在 4℃下箭头新鮮生殖神经細胞、在制冷下箭头甲醇确定生殖神经細胞，恐怕还可以箭头生殖神经細胞核。结论还是出众：全部经济前提必备条件下，范例元素与种群内容均存在太好的各种相关系数，分割更准率超 95%。就算是甲醇确定会造成略微的转录本穿插污染源，生殖神经細胞核配制会出极富 RNA 溜走，生殖神经細胞形式的标注结论还是与新鮮范例保持稳定一样，证明书 HEATag 还可以箭头不同于工作经济前提必备条件下的实验报告范例。

Fig2: HEATag 可在各种條件下已完成单人体细胞转录组混样定量分析

要标出喂母乳家禽和海域无脊椎神经家禽的原代体细胞

假若说細胞系测试图片是 “的基础题”，那团体子模板这就是 “额外题”， 这类子模板通常会因細胞类型的冗杂、情况适合性特殊性，将成为标志技术水平的 “关键点”，而 HEATag 恰恰舞在这类 “关键点” 上展示了其优势。

研究团队选择了大鼠和小鼠的睾丸聚集，这类样本包含精原干细胞、精母细胞、精子细胞等多种类型，对标记一致性的要求极高。实验中，两种动物的睾丸用特异性 HEATag 条形码标记后混合测序，最终获得的 14663 个细胞不禁能被较准分别，各个包括细胞核品类的聚类分析效果都明了可辨。

更令人惊喜的是HEATag对海洋能生物学的适用性。HEATag能在海水的等渗溶液中标记新鲜的海洋动物细胞（如海月水母、大西洋海刺水母）。研究人员用人工海水稀释的HEATag 标记了水母和珊瑚的组织细胞后在 BD Rhapsody 平台测序，最终回收的 6452 个细胞中，HEATag 长条码与动物群转录组有较高一直性，不能产生因高盐生态从而导致的 “标识没用”。后续对甲醇固定的海洋生物细胞测试结果显示，HEATag 在固定样本中的拆分效果优于新鲜样本。

Fig3: HEATag 可体现哺乳期间甲壳动物策划 样例多沉 scRNA-seq 了解

Fig4: HEATag可推动新鲜度海洋生物无脊柱动物界多大 scRNA-seq 了解

HEATag与受损细胞的相结合都不会引发转录组的显著性修改

对样本标记技术来说，“不影响样本本身的 RNA 特征” 是底线。研究团队将来自同一供体的等量的 HEATag 标记细胞与未标记细胞混合测序，对比两者的 RNA 质量、基因捕获数量和细胞组成。结果显示，标记组与未标记组的 RNA 质量没有明显差异，捕获的基因数量基本持平，UMAP 图谱显示两组样本的细胞组成高度相似，转录相似性更是维持在高位。无论是细胞簇的注释结果，还是不同细胞类型的基因回收数量，两组都几乎一致，没有出现 “标记导致的基因表达异常”。这意味着，HEATag在搞定符号工作的同样，就不会对事后的转录混合物析引起影响，衡量了研究方案信息的逼真性。

Fig5: HEATag没影向样本量的 RNA 表述方式

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以后可期

HEATag 能为单细胞系深入分析分享这些？

HEATag 的的价值，远不止有于 “化解标志困难”，它的协调性性和共通性，正当为单细胞膜研究分析点击很多也许 性

从APP3d场景分析

HEATag 能遍布从 “简洁明了更加深入分析分析”（如癌企业与普通 企业、抗癫痫药物治疗与照表）到 “大整体大小深入分析”（如企业细胞系膜图谱设计、mtk量筛分）的全范围之内诉求。随着时间的推移 PIP-seq、Stereo-cell 等新式的可拓张技术性的开发，HEATag 还能进每一步改善单细胞系膜深入分析的通量，注力科学研究队伍落实很大整体大小的楼盘。

从跨领域行业空间来瞧

HEATag 这不仅适用人群于转录组学，还能与表观染色体组学、核营养物质组学、区域组学等方法水平搭配，经由个性指数和寡核苷酸编码序列，HEATag 行枯燥融于有所不同的组学流量，不影晌电磁波驯服淬硬层。的同时，根据HEATag还行趋势单组织细胞糖组学研究探讨方法水平。

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的合作静态

拜谱生物制品与陈凯副教授达到分式的运算加盟意向但这并

指的关注度的是，在 HEATag 方法体显现出强大应运发展空间的的背景下，拜谱微生物工程工程建设已与南方城市大海科学学与工程建设上海实验操作操作室（上海）陈凯客座教授完成开始合作方式有意向的。双方彼此预计重点围绕 HEATag 方法的制造业化趴地、科技项目转化率等导向发展层次合作，着力推进相应低资金、跨种群的单神经神经细胞系图标方法快一点应运于实际效果科技项目场境，为更高实验操作操作室保证有效率、金钱的单神经神经细胞系研发专用工具，助推科技项目做工写作者在神经神经细胞系微生物工程工程建设学、大海微生物工程工程建设学、病症系统等邻域要先拿到更高达到