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N-糖基化修饰组
N-糖基化(N-Glycosylation)是最重要的蛋白质翻译后修饰之一,主要在复杂的多细胞或组织形成过程中起关键作用,参与细胞与细胞的连接、受体配体的相互作用、免疫应答、细胞凋亡及各种发病机理等生物学过程。拜谱生物N-糖基化蛋白质修饰组,利用凝集素富集N-糖基化肽段,高通量,高分辨,可分析不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路,以及候选糖蛋白标志物的筛选等。
N-糖基化修饰组
原理/实验流程
碳水子在工作中的较为多样性和很多N-glycoproteins低呈现含量能让对N-glycosylation形式的定性分析的阐述十分难处。在论文检测低丰度的N糖基化突显蛋清或肽段时,在当中掺入非常多未突显的蛋清肽断,这很特别容易将低丰度的糖基化突显蛋清肽段的卫星信号掩藏。凝素亲和法是如今糖蛋清质组学中软件更广泛的溶合丰度的方式。凝集素(lectin)都是类糖根据蛋清质,能专心分辨某段特种形式的单糖或聚糖中指定的糖基字段而与之根据,什么和什么与糖链可逆反应非共价根据,糖蛋清或糖肽被凝集素阻止完后,一般用指定的单糖根据相互竞争根据凝集素将糖蛋清或糖肽过柱下。 淀粉酶质经过了酶解后来进行凝集素(lectin)生物富集N-糖基化肽段,然而用N-糖酰胺酶(PNGase)在H218O中除去接连在天冬酰胺残基(Asn)上的糖链。该来进行处理因为Asn原子量增高2.9890Da。最后一个用高高精准度LC-MS质谱仪测量脱糖后的肽段,合理利用检索式sql数据库,查证脱糖后原子量与此按理来说原子量的转化各种糖基化体现肽段的回文序列,于是设定该淀粉酶质的N-糖基化位点。N-糖基化位点设定最后,再来进行label-free的作用对其来进行化学发光法研究分析。

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产品特色
  • 01大规模的蛋白质组N-糖基化位点的鉴定与分析

  • 02采用凝集素特异性富集N-糖基化肽段
  • 03高通量,高分辨

应用方向
  • 01
    不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路分析

  • 02
    筛选候选糖蛋白标志物


送样建议
样本类型 常规送样量
植物叶片 湿重≥3g
植物根茎、木质部、韧皮部等 湿重≥5g
细胞样品 细胞量湿重≥5*10^7
组织样品 人、动物、微生物湿重≥50mg
体液样品 血清、血浆体积≥200μl,脑脊液≥500μl,尿液≥1000μl
参考文献
1、Zielinska DF, Gnad F, Schropp K, Wi?niewski JR, Mann M. Mapping N-glycosylation sites across seven evolutionarily distant species reveals a divergent substrate proteome despite a common core machinery. Mol Cell. 2012;46(4):542-548. doi:10.1016/j.molcel.2012.04.031
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